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產(chǎn)品中心
F-DH5a化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

F-DH5a化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

簡(jiǎn)要描述:

F-DH5a化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞:是大腸桿菌DH5a菌株經(jīng)特殊工藝制作所得的快速轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞,無(wú)需42℃熱激,37℃孵育步驟,只需冰浴,10min內(nèi)能完成轉(zhuǎn)化、涂板步驟。經(jīng)pUC19質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率可達(dá)1~5×108 cfu/μg DNA.

產(chǎn)品時(shí)間:2024-03-20

F-DH5a Chemically Competent Cell 大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

 

產(chǎn)品標(biāo)簽:

F-DH5a;F-*0;DH10B;JM109;EPI400;羧芐;卡那霉素;鏈霉素;

 

產(chǎn)品訂購(gòu):

貨號(hào)

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

價(jià)格(元)  

MF2348-2000UL   

F-DH5a Chemically Competent Cell 大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞 

20×100μl     

280

MF2348-10000UL

F-DH5a Chemically Competent Cell 大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

100×100μl

1280

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產(chǎn)品組分:

組分編號(hào)     

組分名稱

貨號(hào)(規(guī)格)

MF2348-2000UL    

MF2348-10000UL   

MF2348-A

F-DH5a Competent Cell

20×100μl

100×100μl

MF2348-B

Control Vector puC19, 10pg/μl    

10μl

10μl

 

菌株描述

DH5a菌株基因型:F-φ80 lac ZΔM15 Δ(lacZYA-arg F) U169 endA1 recA1 hsdR17(rk-,mk+) supE44λ- thi-1 gyrA96 relA1 phoA

 

產(chǎn)品描述

本品是大腸桿菌DH5a菌株經(jīng)特殊工藝制作所得的快速轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞,無(wú)需42℃熱激,37℃孵育步驟,只需冰浴,10min內(nèi)能完成轉(zhuǎn)化、涂板步驟。經(jīng)pUC19質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率可達(dá)1~5×108 cfu/μg DNA。且在-80℃能穩(wěn)定保存幾個(gè)月轉(zhuǎn)化效率不發(fā)生改變。

 

注意事項(xiàng)

5)   產(chǎn)品包裝內(nèi)含質(zhì)粒pUC19 DNA(10pg/μl),供對(duì)照實(shí)驗(yàn)用。

6)   為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

 

使用方法【所有操作均在無(wú)菌條件的標(biāo)準(zhǔn)下進(jìn)行】

一、  快速轉(zhuǎn)化操作(10min)

1.1    提前15min將用到的篩選培養(yǎng)平板拿到37℃預(yù)熱。

1.2    取F-DH5a感受態(tài)細(xì)胞從-80℃取出,迅速插入冰中,5min后待菌塊融化,加入目的DNA(質(zhì)粒或連接產(chǎn)物),并用手彈打管底輕輕混勻,冰中靜置5min。

1.3    用移液槍將感受態(tài)細(xì)胞-DNA混合物轉(zhuǎn)移到37℃預(yù)熱的LB篩選培養(yǎng)平板上,用無(wú)菌的涂布棒將細(xì)胞均勻涂開(kāi),表面無(wú)水漬。

1.4    將平板倒置于37℃過(guò)夜培養(yǎng)。如果進(jìn)行藍(lán)白斑篩選,至少培養(yǎng)15h。

【注意】:F-DH5a感受態(tài)細(xì)胞涂含氨芐或羧芐篩選培養(yǎng)平板時(shí)效率搞,若涂卡那霉素或其他抗生素平板,轉(zhuǎn)化效率會(huì)下降(由于沒(méi)有孵育步驟,卡那霉素等對(duì)菌體毒性較大)。若要提高卡那霉素或其他抗性質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化效率,按照快速熱激轉(zhuǎn)化操作。

 

二、  快速熱激轉(zhuǎn)化操作(25min,能提高轉(zhuǎn)化效率)

【注意】:當(dāng)質(zhì)粒>7kb,通過(guò)以下熱激轉(zhuǎn)化操作:取F-DH5a感受態(tài)細(xì)胞從-80℃取出,迅速插入冰中,5min后待菌塊融化,加入目的DNA(質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物),并用手管底輕輕混勻,冰中靜置20min。

42℃水浴熱激45s,迅速放回冰上并靜置2min。加入700μl 無(wú)菌的LB培養(yǎng)基(不含抗生素),混勻后置于37℃ 搖床,200 rpm振蕩培養(yǎng)30min。之后涂板。

 

相關(guān)產(chǎn)品

貨號(hào)

名稱

規(guī)格             

MF2311-2000UL   

DH5α Chemically Competent Cell大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

20×100μl

MF2312-2000UL

*0 Chemically Competent Cell大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

20×100μl

MF2313-2000UL

JM109 Chemically Competent Cell大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

20×100μl

MF2314-1000UL

DH10B Chemically Competent Cell大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

10×100μl

MF2315-1000UL

XL10-Gold Chemically Competent Cell大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞    

10×100μl

MF2347-2000UL

F-*0 Chemically Competent Cell大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

20×100μl

MF2348-2000UL

F-DH5a Chemically Competent Cell 大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

20×100μl

MF2349-1000UL

*0F` Chemically Competent Cell 大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

10×100μl

MF2350-1000UL

EPI400 Chemically Competent Cell 大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

10×100μl

MS0021-10G

Chloramphenicol, USP Grade氯霉素

10g

MS0018-10G

Ampicillin, Sodium Salt氨芐青霉素鈉

10g

MS0017-5G

Carbenicillin, Disodium Salt羧芐青霉素二鈉鹽

5g

MS0019-10G

Kanamycin Sulfate硫酸卡那霉素

10g

MS0014-1G

Rifampicin, USP Grade利福平

1g

 

 — —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】

 

上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域研究的試劑、儀器和實(shí)驗(yàn)室消耗品與實(shí)驗(yàn)服務(wù)工作,主要從事細(xì)胞生物學(xué)、植物學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)、蛋白組學(xué)。生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產(chǎn)等領(lǐng)域。 本公司秉承“以人為本,以誠(chéng)為信、合同守信”的經(jīng)營(yíng)理念。堅(jiān)持"品質(zhì)保障"的原則為廣大客戶提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品。

 

F-DH5a化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

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